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A101D細胞株復蘇失敗原因分析

發(fā)布時間:2017-03-23瀏覽:1673次

A101D細胞株復蘇失敗原因分析

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產品名稱:A101D細胞

中文名稱:人乳腺癌細胞

種屬:人

來源:乳腺導管癌;女性

培養(yǎng)條件:EMEM/1640

生長狀態(tài):貼壁

A101D細胞株復蘇失敗原因分析

其他細胞培養(yǎng)用液

在細胞培養(yǎng)過程中,除了培養(yǎng)基外,還經常用到一些平衡鹽溶液、消化液、pH調整液等。

一、平衡鹽溶液(balanced  salt  solution,BSS):主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。主要用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配制其他試劑等。zui簡單的BSSRingerD-Hank'sHank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+、Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有較高的NaHCO3(2.2g/L),適合于5%CO2  的培養(yǎng)條件,Hank's平衡液僅含有0.35g/L  NaHCO3,不能用于5%CO2的環(huán)境,若放入CO2培養(yǎng)相,溶液將迅速變酸,使用時應注意。

配制溶液應使用雙蒸水或去離子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+,應當首先溶解這些成分。配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫滅菌。

 

A101D細胞株復蘇失敗原因分析

EVSA-T                                           人乳腺癌細胞              乳腺癌;腹水轉移;女性     DMEM     貼壁

BT-483                                           人乳腺導管癌細胞              乳腺導管癌;女性         DMEM     貼壁

MDA-MB-435                              人乳腺癌細胞              乳腺癌     DMEM     貼壁

MDA-MB-157                              人乳腺癌細胞              乳腺癌;胸腔積液轉移;女性     L15   貼壁

SW1417                                         人結腸癌細胞              結腸癌;女性         L15   貼壁

MH-S                                              小鼠肺泡巨噬細胞         小鼠         巨噬細胞;雄性;SV40轉化;BALB/cJ       1640         懸浮

L2                                                    大鼠肺泡上皮細胞         大鼠         肺泡;上皮細胞     DMEM     貼壁

KBM7                                             人慢性髓白血病細胞細胞          慢性髓原白血??;男性         IMDM      懸浮

SUM149PT                                   人乳腺癌細胞              乳腺癌;女性         DMEM     貼壁

FL83B                                             小鼠正常肝細胞     小鼠         肝;自發(fā)永生;C57BL/6J      DMEM     貼壁

PL45                                               人胰腺導管癌細胞              胰腺導管癌;男性         DMEM     貼壁

MPC5                                             小鼠腎足細胞         小鼠         腎足細胞;SV40轉化    DMEM     貼壁

HUVSMC                                       人臍靜脈平滑肌細胞          臍靜脈平滑肌         DMEM     貼壁

Htori-3                                           人正常甲狀腺細胞              甲狀腺;SV40轉化;女性    F12K          貼壁

TPC1                                              人甲狀腺癌細胞          甲狀腺乳頭狀癌;女性         L15   貼壁

C28/I2                                            人正常軟骨細胞          軟骨;SV40轉化;女性        DMEM     貼壁

hADSCs                                         人脂肪間充質干細胞          脂肪間充質干細胞         DMEM     貼壁

M059K                                           人膠質瘤細胞              膠質瘤;男性         EMEM      貼壁

C1498                                            小鼠白血病細胞     小鼠         白血病;雌性;C57BL/6J      DMEM     懸浮

SNU878                                         人肝癌細胞          肝癌;女性     1640         貼壁

SNU886                                         人肝癌細胞          肝癌;男性     1640         貼壁

NCI-H1417                                   人小細胞肺癌細胞              小細胞肺癌;女性         1640         貼壁

HNSC                                             人神經干細胞              神經干細胞     DMEM     貼壁

2BS                                                 人胚肺成纖維細胞              胚肺;成纖維細胞;女性     DMEM     貼壁

HIBEpiC                                         人肝內膽管上皮細胞          肝內膽管;上皮細胞     1640         貼壁

hUC-MSC                                      人臍帶間充質干細胞          臍帶;間充質干細胞     DMEM     貼壁

MBT-2                                            小鼠膀胱癌細胞     小鼠         膀胱移行細胞癌;C3H/He    1640         貼壁

32DClone3                                   小鼠骨髓淋巴母細胞     小鼠         骨髓淋巴瘤;C3H/HeJ  DMEM     貼壁

A-72                                               犬癌細胞              癌細胞;金毛獵犬         1640         貼壁

MIHA                                             正常人肝細胞                   1640         貼壁

IR983F                                           大鼠骨髓瘤細胞     大鼠         骨髓瘤     IMDM      懸浮

SF9                                                  昆蟲卵巢細胞         昆蟲         卵巢;自發(fā)永生;雌性         Grace's Ins       懸浮+貼壁

Ishikawa                                       人子宮內膜癌細胞              內膜腺癌;女性     1640         貼壁

HCEC                                             人角膜上皮細胞          角膜;上皮細胞     1640         貼壁

HCC1500                                      人乳腺管癌細胞          乳腺管癌;女性     DMEM     貼壁

Th17                                               小鼠輔助性T細胞          小鼠         輔助性T細胞          1640         懸浮

消化液:取材進行原代培養(yǎng)時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液,傳代培養(yǎng)時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液,有時也用膠原酶(collagenase)溶液。

1、胰酶溶液:胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,常見有11251250,即一份胰酶可消化125250份酪蛋白。組織培養(yǎng)用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度,配制時要用不含Ca2+    Mg2+及血清的平衡鹽溶液(如前面的D-Hank's),因為這些物質會對胰酶產生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH8-9,配制胰酶溶液應將液體調至pH8左右,充分溶解,過濾除菌。過濾后可以再調只pH7.5,也可不調。

使用細胞清洗液配制胰酶消化液:含0.5%胰酶的細胞清洗液(100ml細胞清洗液加0.5g胰酶),過濾除菌,分裝于4度保存。

2EDTA溶液:EDTA溶液也常用來解離細胞,它的作用機制是破壞細胞間的連接。對于一些貼壁特別牢固的細胞,還可以用EDTA和胰酶的混合液進行消化。EDTA溶液的使用濃度為0.02%,配制時應加堿助溶,配制后可過濾除菌,也可高溫消毒滅菌。

3、膠原酶溶液:膠原酶在上皮類細胞原代培養(yǎng)時經常使用,膠原酶作用的對象是膠原組織,因此不容易對細胞產生損傷。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L200000U/L,作用的*pH6.5。膠原酶不受Ca2+ 、Mg2+及血清的抑制,配制時可用PBS。

A101D細胞株復蘇失敗原因分析

 

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